Tutti, medici e non medici, osserviamo ogni giorno, le grandi capacità riparatrici della cute: ognuno sa che, a meno che non si sovrammetta un'infezione, quando i due labbri della ferita combacino, entro 7 giorni tutto torna perfettamente come prima.

La funzione primaria della cute è quella di servire come barriera protettiva nei confronti dell'ambiente. La perdita dell'integrità di estese porzioni della cute, in seguito a lesioni o a malattie, può portare a gravi danni e perfino alla morte.

Gli obbiettivi principali del trattamento delle ferite sono:

I recenti miglioramenti nelle conoscenze nel campo della biologia cellulare e molecolare hanno allargato le possibilità d'influire sui processi biologici che sono interessati nella guarigione delle ferite e nella rigenerazione della cute: tutto ciò ha portato a miglioramenti della loro cura.

La guarigione delle ferite è un processo dinamico, interattivo, che interessa mediatori solubili, cellule del sangue, matrice extracellulare e cellule parenchimali.

Le ferite guariscono secondo 3 fasi, che si sovrammettono l'una all'altra nel tempo:

Ogni lesione di tessuto porta a un'interruzione di vasi sanguigni e a fuoriuscita dei costituenti del sangue. Il coagulo sanguigno che si viene a formare ristabilisce l'emostasi e fornisce una matrice extracellulare provvisoria per la migrazione delle cellule (Vedi Figura n.1.)..

La piastrine non soltanto facilitano l'emostasi, ma secernono molti mediatori, utili per la guarigione della ferita (fattori di crescita, originati dalle piastrine, che attraggono i macrofagi e i fibroblasti). Ma in assenza di emorragia, è stato visto che le piastrine non svolgono un ruolo essenziale per la guarigione della ferita. Numerosi mediatori vasoattivi e fattori chemiotattici sono formati dalla coagulazione, dai fattori del complemento attivati e dalle cellule parenchimasli lese e attivate. Tutte queste sostanze reclutano leucociti infiammatori nella sede della lesione.

Si pensa che siano necessari fattori di crescita per i movimenti delle cellule all'interno della ferita.

I neutrofili ripuliscono la ferita dalle particelle estranee e dai batteri; essi sono poi allontanati dalla farita o sono fagocitati dai macrofagi. Infatti i macrofagi, richiamati da fattori specifici chemiotattici (frammenti della proteina della matrice extraxellulare, fattore di crescita b, proteina 1 attraente i monociti) infiltrano la sede della ferita e divengono macrofagi attivati, che liberano fattori di crescita, come il fattore di crescita, originato dalle piastrine e il fattore di crescita dell'endotelio vascolare, che iniziano a formare il tessuto di granulazione. I macrofagi si legano alle proteine specifiche della matrice extracellulare con i loro recettori integrine, un'azione che stimola la fagocitosi dei microrganismi e dei frammenti della matrice extracellulare da parte dei macrofagi.

L'aderenza alla matrice extracellulare stimola anche i monociti a subire una metamorfosi per passare a macrofagi infiammatori e riparatori. Sia i monociti che i macrofagi attivati esprimono il fattore 1, stimolante le colonie, una citochina necessaria per la sopravvivenza dei monociti e dei macrofagi. Essi secernono anche il tumor necrosi factor a, una potente citochina pro-infimmatoria, il fattore di crescita delle piastrine, un potente chemioattrattivo e i mitogeni per i fibroblasti.

Altre importanti citochine, espresse dai monociti e dai macrofagi, sono rappresentate dal fattore di crescita trasformante a, dall'interleuchina 1, dal fattore di crescita trasformante b e dal fattore 1 di crescita insulino-simile.

I fattori di crescita, originati dai monociti e dai macrofagi sono indispenabili per l'inizio e la propagazione del nuovo tessuto nelle ferite, perchè gli animali che ne sono privi hanno difficoltà a riparare le ferite. Per queste ragioni i macrofagi sono considerati avere un ruolo essenziale nella transizione dall'infiammazione alla riparazione.

La riepitelizzazione delle ferite inizia poche ore dopo la lesione.

Le cellule epidermiche delle appendici cutenee, come i follicoli piliferi, rimuovono precocemente il sangue coagulato e lo stroma danneggiato dallo spazio della lesione. Nello stesso tempo le cellule presentano notevoli alterazioni fenotipiche, che includono la retrazione dei tonofilamenti intracellulari, la dissoluzione della maggior parte dei desmosomi intercellulari, che costituiscono le connessioni fra le cellule e la formazione di filamenti di actina che permettono i movimenti delle cellule. Contemporaneamente le cellule epidermiche e dermiche non aderiscono più le une alle altre per la scomparsa dei legami degli emidesmosomi che collegano l'epidermide alla membrana basale, che segue i movimenti laterali delle cellule epidermiche. I recettori dell'integrina sulle cellule epidermiche li portano a interagire con una varietà di proteine della matrice extracellulare (per esempio fibronectina e vibronectina) che sono intercalate con il collageno stromale tipo I, ai margini della ferita e si intrecciano con il coagulo di fibrina nell'area della ferita. Le cellule epidermiche migranti suddividono la ferita, separando la parti morte o sofferenti dal tessuto vivo.

I vasi sanguigni si avanzano nel coagulo din fibrin. Le proteinasi sembrano siano necessarie per i movimenti delle cellule.

u-PA indica l'attivatore del plasminogeno tipo urochinasi

MMP-1, 2, 3 e 13 indicano le metalloproteine della matrice 1, 2, 3 e 13 (collegenasi 1, gelatinasi A, stromelisina 1 e collagenasi 3 rispettivamente)

t-PA indica l'attivatore del plasminogeno tissutale

La degradazione della matrice extracellulare, che è necessaria per le cellule epidermiche che migrano fra il derma collageno e l'escara di fibrina, dipende dalla produzione di collagenasi da parte delle cellule epidermiche, come dall'attivazione della plasmina da parte dell'attivatore del plasminogeno, prodotto dalle cellule epidermiche. L'attivatore del plasminogeno infatti attiva la collagenasi e facilita inoltre la degradazione del collageno e delle proteine della matrice extracellulare.

Da 1 a 2 giorni dopo la lesione, le cellule epidermiche ai bordi della ferita, iniziano a proliferare in ritardo in confronto alle cellule attivamente migranti. Lo stimolo necessario per la proliferazione e la migrazione delle cellule epidermiche durante la riepitelizzazione non è stato ancora identificato, ma di sicuro esso esiste. L'assenza delle cellule vicino ai margini della ferita (l'effetto "bordo libero") può indurrre tuttavia sia la migrazione che la proliferazione delle cellule epidermiche. La liberazione locale di fattori di crescita e l'aumentata espressione dei recettori per questi fattori possono anche rappresentare lo stimolo per questi processi (fattori di crescita epidermica, fattore a trasformate la crescita, fattore di crescita dei cheratinociti). Dopo il completamento della riepitelizzazione, ricompaiono le proteine della membrana basale, in una ordinata sequenza, dai margini verso l'interno della ferita. Le cellule epidermiche riacquistano il loro normale fenotipo e sono di nuovo strettamente adese alla nuova membrana basale e al derma sottostante.

Il nuovo stroma, chiamato tessuto di granulazione, comincia a invadere lo spazio della ferita, all'incirca 4 giorni dopo la lesione. Numerosi nuovi capillari si sfioccano all'interno del nuovo stroma. Macrofagi, fibroblasti e vasi sanguigni penetrano contemporaneamente all'interno della ferita. I macrofagi costituiscono una fonte continua dei fattori di crescita necessari a stimolare la fibroplasia e l'angiogenesi, mentre i fibroblasti producono nuova matrice exrtraxcellulare, necessaria per assicurare la crescita delle cellule. Intanto i vasi sanguigni portano l'ossigeno e i nutrienti necessari per mantenere il metabolismo delle cellule.

I fattori di crescita, soprattutto il fattore di crescita derivato dalle piastrine e il fattore trasformante di crescita b1, insieme con le molecole della matrice extracellulare, stimolano probabilmente i fibroblasti del tessuto intorno alla ferita, a proliferare , a esprimere gli appropriati recettori per l'integrina e a migrare nello spazio della ferita. Questi fattori hanno trovato un'utile indicazione nella pratica corrente: il fattore di crescita, originato dalle piastrine, accelera la guarigione delle piaghe pressorie croniche, delle ulcere diabetiche, mentre il fattore di crescita dei

fibroblasti basali viene usato con qualche successo nel trattare le ulcere pressorie croniche.

Le molecole strutturali della matrice extracellulere, di recente formazione, chiamata matrice provvisoria, contribuiscono alla formazione del tessuto di granulazione: queste molecole sono rappresentate dalla fibrina, dalla fibronectina e dall'acido ialuronico. Infatti la comparsa della fibronectina e dei recettori dell'integrina, che legano la fibrinectina stessa, la fibrina o ambedue ai fibroblasti, sembra essere il passo limitante la velocità di formazione del tessuto di granulazione. I fibroblasti sono d'altra parte responsabili della sintesi, della deposizione e del rimodellamento della matrice extracellulare. All'inverso la matrice extracellulare può evere un effetto positivo o negativo sulla capacità dei fibroblasti di sintetizzare, depositare, rimodellare e in genere interagire con la matrice extracellulare.

I movimenti delle cellule all'interno del coagulo sanguigno, formato dalla fibrina, o nella matrice extracellularte fortemente compatta, può richiedere un attivo sistema proteolitico che può aprire la strada alla migrazione cellulare. Molti degli enzimi, originati dai fibroblasti, oltre alla plasmina del siero, sono adibiti a quest'opera, insieme all'attivatore del plasmionogeno, alle collagenasi, alla gelatinasi A e alla tromelisina.

Dopo essere migrati all'interno della ferita, i fibroblasti cominciato a sintetizzare la matrice extracellulare, che viene successivamente rimpiazzata dalla matrice del collageno, forse in seguito all'azione del fattore b1 di crescita trasformante.

Dopo che un'abbondante quantità di matrice del collageno è stata deposittata nella ferita, i fikroblasti cessano di produrre collageno e il tessuto di granulazione, ricco di fibroblasti, viene rimpiazzato da una cicatrice, relativamente povera di cellule. Le cellule presenti nella ferita vanno incontro ad apoptosi, in seguito all'azione di un segnale sconosciuto. La mancata regolazione di questi processi è la responsabile delle alterazioni della fibrosi della cicatrice, che porta aslla formazione del cheloide, della morfea e dello scleroderma.

Per la nutrizione del nuovo tessuto di granulazione è necessaria la formazione di nuovi vasi sanguigni. L'angiogenesi è un processo complesso che si realizza nella matrice extracellulare del letto della ferita, al quale partecipa la migrazione e la stimolazione mitogena delle cellule endoteliali.

L'induzione dell'angiogenesi fu inizialmente attribuita al fattore di crescita fibroblastica acido o basico. Ma in seguito è risultato che molte altre molecole posseggono attività angiogenica, come il fattore di crescita dell'endotelio vascolare, il fattore b di crescita trasformante, l'angiotropina, l'angiopoietina I e la trombospondina. La bassa tensione di ossigeno e l'elevata concentrazione di acido lattico possono d'altra parte stimolare l'angiogenesi. Anche le cellule epidermiche stimolate della ferita secernono grandi quantià di fattore di crescita dell'endotelio vascolare. Il fattore basico di crescita fibroblastica può costituire la piattaforma dell'angiogenesi durante i primi 3 giorni di riparazione della ferita, mentre il fattore di crescita delle cellule dell'endotelio vascolare è importante per l'angiogenesi durante la formazione del tessuto di granulazione da 4° al 7° giorno.

Oltre ai ricordati fattori dell'angiogenesi, sono necessari anche la matrice extracellulare e i recettori endoteliali per la formazione della matrice provvisoria. Durante la proliferazione, le cellule endoteliali microvascolari, vicine o all'interno della ferita, depositano elevate quantità di fibronectina all'interno della parete vasale. La fibronectina perivascolare può agire come una guida per i movimenti delle cellule endoteliali, all'interno della ferita. Anche l'espressione e l'attività delle proteasi sono neceasarie per l'angiogenesi.

I vari passi, che si susseguono nella angigenesi sono ben visibili nella Figura n.2:

- il trauma causa distruzione di tessuto e ipossia

- i fattori necessari per l'angiogenesi, come il fattore basico e il fattore di crescita dei fibloblasti, sono rilasciati immediatamente dai macrofagi, dopo la distruzione cellulare

- l'ipossia stimola la produzione del fattore di crescita delle cellule dell'endotelio vascolare da parte delle cellule dell'epidermide

- enzimi proteolitici, liberati dal tessuto connettivo, degradano le proteine della matrice extracellulare

- frammenti di questa degradazione richiamano i monociti del sangue periferico nella sede della lesione, dove essi iniziano ad attivare i macrofagi a liberare i fattori dell'angiogenesi.

- alcuni di questi fattori, come il fattire basico di crescita dei fibroblasti, stimolano le cellule endoteliali a liberare l'attivatore del plasminogeno e la procollagenesi

- l'att9 ivatore del plasminogeni o converte il plasminogeno in plasmina, mentre la procollagenasi attiva la collagenasi: ambedue le proteasi digeriscono la membrana basale

- la frammentazione della membrana basale induce le cellule endoteliali, stimolate dai fattori dell'angiogenesi a migrare per formare i nuovi vasi sanguigni nella sede della lesione.

- quando la lesione si è ricchita di nuovo tessuto di granulazione, l'angiogenesi cessa e la maggior parte dei nuovi vasi sanguigni scompare, come conseguenza dell'apoptosi.

- la morte programmata di queste cellule è regolata probabilmente da una varietà di molecole della matricre, come la trombospondina 1 e 2, i fattori antiangiogenesi, come l'angiostatina, l'endostatina e l'angiopoietina 2.